Maladie de Chagas transfusionnelle: Surveillance parasitologique et sérologique d’un receveur infecté et d’un donneur de sang

La maladie de Chagas est endémique en Amérique latine, mais la migration humaine étend sa distribution Ce rapport décrit l’évolution parasitologique et sérologique de la maladie chez un patient espagnol infecté par une transfusion sanguine, ainsi que la surveillance du donneur Avant de subir une immunosuppression, multitransfusée les patients doivent subir un test de dépistage des anticorps anti-Trypanosoma cruzi

L’apparition des cas dans les zones où le vecteur de la maladie est introuvable La progression naturelle de l’infection implique une phase aiguë et chronique Dans les zones d’endémicité les deux formes sont observées, alors que dans les zones non endémiques, la grande majorité des infections sont diagnostiqués dans la phase chronique, bien que% des personnes infectées restent asymptomatiques Malgré les progrès technologiques, il n’existe pas de technique de référence standard pour le diagnostic de la maladie de Chagas Dans la phase aiguë, les méthodes diagnostiques parasitologiques sont les plus fiables. il peut y avoir peu ou pas de parasitémie, et le diagnostic est fait principalement sur la base des résultats des tests d’anticorps anti-Trypanosoma cruzi Ces dernières années, l’Espagne est devenue l’un des pays de destination préférés des émigrants sud-américains. l’intégration sociale en Espagne, et ils soutiennent souvent de manière volontaire et altruiste des programmes de don de sang. Décret royal / Le présent travail décrit l’évaluation rétrospective en laboratoire d’un patient espagnol atteint de leucémie et décédé d’une maladie de Chagas contractée par transfusion de sang contaminé, l’étude rétrospective pour identifier la source de l’infection, et la surveillance des méthodes et des méthodes du donneur. Des anticorps anti-T cruzi ont été recherchés dans des échantillons de sérum prélevés à différents moments avant le décès du patient; Ces échantillons ont été stockés à – ° C dans la banque de sérum du Centre National de Microbiologie du Centre National de Microbiologie [Madrid]. On a également recherché l’ADN parasitaire dans ces échantillons, dans le LCR prélevé avant la mort et dans les échantillons de nécropsie pulmonaire, rénale et hépatique. l’étude rétrospective, des échantillons de sérums de donneurs dont les dérivés sanguins avaient été transfusés chez le patient ont été examinés. Ils étaient d’origine espagnole, brésiliens, équatoriens, colombiens, français, polonais et allemands. à Albacete, dans le sud-est de l’Espagne, et a vécu à Jaén, dans le sud de l’Espagne. Des échantillons de tous les donneurs de Madrid ont été conservés à la bibliothèque de sérum du Centre de transfusion de Madrid, Centro de Transfusión de Madrid; de nouveaux échantillons ont été prélevés chez les donneurs vivant à Albacete et à Jaén une fois qu’ils avaient été retrouvés. Des échantillons sériques et sanguins ont été prélevés sur le donneur de sang infecté pour confirmer les résultats de l’étude rétrospective et suivre le développement de l’infection. ont été détectés par le test d’immunofluorescence indirecte IFAT et par ELISA avec des modifications introduites par le Département de parasitologie au Centro Nacional de Microbiología T cruzi ADN a été détecté par PCR avec l’utilisation d’oligonucléotides – et Tcz-Tcz, qui amplifient la variable région de l’ADN du kinétoplaste minicircle bp et une séquence répétitive de l’ADN satellite bp, respectivement Tous les tests ont été effectués en double avec contrôles positifs et négatifsResults Le patient espagnol était un homme âgé de -year qui avait des antécédents de leucémie finalement nécessité une greffe de sang de cordon ombilical; il a reçu des dérivés sanguins d’au moins des personnes ayant donné du sang dans différents centres de transfusion. En janvier, quelques jours après le début de l’infection, on a recherché une fièvre d’origine inconnue. Aucun des agents infectieux responsables de ce type de virus lymphotrope. Après le traitement par l’itraconazole, les symptômes ont diminué et le patient a été évalué et traité en vue de la transplantation de sang de cordon comme décrit par Forés et al [ Au cours de la première semaine de juillet après le début de l’infection, le Département de parasitologie du Centro Nacional de Microbiología a reçu plusieurs échantillons de sérum et de liquide céphalorachidien obtenus du patient, ainsi que les surnageants des cultures cellulaires utilisées pour l’identification microscopique des flagellés. Dans les tests de diagnostic, la microscopie a révélé la présence de trypomastigotes et Les tests d’anticorps anti-T cruzi ont cependant donné des résultats négatifs. Le patient est décédé d’une défaillance multiviscérale un jour après le début de l’infection, et une évaluation rétrospective a été entreprise pour déterminer la source de l’infection. ont été envoyés au Centro Nacional de Microbiología pour le diagnostic de problèmes autres que la maladie de Chagas et qui ont été conservés dans la banque de sérum de notre centre ont été analysés par IFAT, ELISA et PCR. La PCR a montré que T cruzi est apparu dans le sérum du patient. il a reçu une transfusion de plaquettes IFAT et ELISA ont confirmé une séroconversion positive le jour suivant le début de l’infection, suivie d’une séroconversion négative le lendemain du début de l’infection.

Figure View largeTarque de téléchargementParasitologiques et sérologiques en fonction de l’état clinique du patient Le jour où le patient a reçu le concentré plaquettaire a été défini comme le jour A, Changements dans les niveaux d’anticorps anti-Trypanosoma cruzi selon immunofluorescence indirecte test IFAT et ELISA La dernière dilution du sérum avec une réaction P positive est montré B, Présence de parasites tels que déterminés par microscopie et PCR Lanes,, et, Contrôles négatifs Lanes,, et, Positifs contrôles Lanes -, -, et -, Duplicata échantillons d’ADN de T cruzi amplifié à partir de rein, foie, et les tissus pulmonaires, respectivement Les résultats de la PCR obtenus en utilisant les oligonucléotides – ont confirmé ceux obtenus avec la ligne pointillée Tcz-Tcz, Threshold; OD, densité optiqueFigure View largeTéléchargement diapositive et sérologique en fonction de l’état clinique du patient Le jour où le patient a reçu le concentré plaquettaire a été défini comme jour A, Changements dans les niveaux d’anticorps anti-Trypanosoma cruzi selon immunofluorescence indirecte test IFAT et ELISA la dernière dilution de sérum avec une réaction positive de P est montrée B, Présence de parasites telle que déterminée par microscopie et PCR Lanes,, et, Contrôles négatifs Lanes,, et, Contrôles positifs Lanes -, -, et -, Duplicate samples of T cruzi DNA amplified à partir de tissus rénaux, hépatiques et pulmonaires, respectivement. Les résultats de PCR obtenus en utilisant les oligonucléotides – ont confirmé ceux obtenus avec la ligne pointillée Tcz-Tcz, Threshold; OD, densité optique Dans le même temps, les donneurs dont les produits sanguins avaient été donnés au patient ont été criblés pour des anticorps anti-T cruzi figure A Cette analyse exclut tous les donneurs d’Albacete et de Jaén et des donneurs de Madrid comme sources potentielles d’infection IFAT et ELISA ont donné des résultats positifs pour le donneur résidant à Madrid. Cette personne a fait un don de sang au début du mois de décembre. le patient a reçu un concentré de plaquettes préparé à partir de cette journée de sang

graphie, et échocardiographie, qui ont tous donné des résultats normaux Aucun autre signe ou symptôme d ‘intérêt n’a été noté sauf pour la constipation, que le donneur avait éprouvée pendant quelques années une fois par jour à cette occasion. détecter les parasites dans le sang En mars, un traitement par benznidazole mg / kg / jour a été commencé, mais il a été suspendu après quelques jours en raison de l’apparition de maux de tête intenses, méralgie paresthésique du nerf fémoro-cutané et exanthème maculaire généralisé. ce traitement, les résultats des tests pour les parasites sanguins sont restés négatifs, bien que les anticorps anti-T cruzi soient restés détectables. La figure montre que les anticorps anti-T cruzi étaient détectables chez le patient seulement avant le début du protocole immunosuppresseur. début de l’infection En l’absence de réponse immunitaire, les parasites ont traversé barrière hémato-encéphalique et infection du système nerveux. Ceci a été confirmé par la présence d’ADN de T cruzi dans l’échantillon de LCR. Etant donné l’état général du patient, le traitement au benznidazole n’a pas eu d’effet immédiat sur la charge parasitaire. le titre d’anticorps / La détection de T cruzi dans les échantillons de nécropsie est en accord avec la distribution systémique du parasite et la défaillance multiviscérale qui a causé la mort du patient. La cinétique du titre d’anticorps peut s’expliquer par une infection aiguë récemment acquise. de T cruzi par PCR depuis le jour de janvier après le début de l’infection est conforme à la date à laquelle le patient a reçu les produits sanguins infectés Ainsi, les résultats des investigations parasitologiques et sérologiques sont en accord avec les signes cliniques et les symptômes du patient. de la maladie de Chagas La maladie de Chagas transfusionnelle aiguë peut durer de plusieurs mois après l’entrée du parasite Les résultats de PCR divergents positifs et négatifs obtenus pour le donneur infecté avant le traitement par le benznidazole étaient en accord avec la parasitémie faible typique de la phase chronique de l’infection à T. cruzi. Ces résultats pourraient aussi être dus à un échantillon de sang le deuxième échantillon a -mL Lorsque les concentrations de parasites sanguins sont faibles, la détection est plus probable dans les volumes sanguins plus importants De même, dans les unités de dons de sang, la collecte de mL de sang augmente le risque de contamination par un petit nombre de parasites. Pour une culture sanguine réussie et un xénodiagnostic artificiel, il est recommandé de traiter les prélèvements sanguins à h de la collecte afin d’assurer la viabilité du parasite ; dans le cas présent, les parasites sont restés viables pendant toute la période de conservation des plaquettes, car la température de maintien ° C; L’immunodépression du receveur causée par sa leucémie et l’immunosuppression induite avant la transplantation de sang de cordon semblent avoir été d’une importance maximale dans le développement de l’infection, a-t-il ajouté. Le rôle du système immunitaire de l’hôte dans la protection contre l’infection et le développement de l’infection Chez les patients immunodéprimés, l’infection peut être sévère et avoir des conséquences fatales. Il est donc recommandé que les donneurs d’organes à haut risque soient dépistage des anticorps anti-T cruzi, ainsi que des candidats multitransfusés pour la transplantation – indépendamment de leur origine – s’ils doivent subir des protocoles d’immunosuppression. Il faut souligner qu’avant octobre, la législation espagnole sur le don de sang excluait définitivement les donneurs atteints de la maladie de Chagas. envisager l’utilisation d’un test de dépistage fiable pour la détection de T cruzi Dans le cas présent, le donneur ne connaissait pas son statut d’infection trypanosomienne et aucun risque n’a été détecté lors de l’entretien d’évaluation de la pré-donation. Son don de sang a donc été accepté en décembre Par contre, la législation actuelle d’octobre énonce de nouvelles exigences techniques pour le don de sang. ] et établit l’utilisation d’un test diagnostique T cruzi pour évaluer l’éligibilité des donneurs des régions où la maladie de Chagas est endémique, ainsi que des facteurs de risque d’infection. En vertu de cette législation, le donneur actuel aurait été exclu. le sang est un problème permanent, et la population latino-américaine – un million de résidents – est déjà devenue une source importante de donneurs potentiels. Une enquête préliminaire sur la séropositivité chez les immigrants des zones d’endémicité a donné des estimations positives de près de la principale voie de transmission de T cruzi en Espagne, la nouvelle législation garantit la qualité du sang et transfusions de composants sanguins pour les receveurs et permet l’inclusion des immigrants des Amériques dans le bassin de donneurs de sang potentiels

Remerciements

Soutien financier Fondo de Investigación Sanitaria RETIC-RICET, RD //, et RD // Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: aucun conflit