Stimuler les anticorps de neutralisation hétérotubes chez les receveurs du vaccin contre la grippe pandémique H1N1 2009

Contexte Une vaccination de masse a été mise en place pour prévenir la propagation du virus de la grippe pandémique de 2009 en Chine. Des informations très limitées sont disponibles pour savoir si ce vaccin induit des anticorps de neutralisation croisée contre d’autres sous-types de virus grippaux. dans les échantillons sériques de 23 receveurs du vaccin contre la grippe pandémique de 2009Résultats Une dose de vaccin pandémique a non seulement stimulé de bons anticorps de neutralisation contre le virus grippal A H1N1 2009, mais a aussi augmenté les activités de neutralisation croisée contre H3N2 et le virus H5N1 de la grippe aviaire hautement pathogène. et moins à H2N2 Les activités de neutralisation croisée ont été complètement supprimées après l’élimination de l’immunoglobuline G IgG. En revanche, la vaccination H1N1 seule chez les souris naïfs de grippe n’a suscité que de vigoureuses activités neutralisantes homologues, mais pas de neutralisation croisée. activités ioniquesConclusions Nos données suggèrent que les épitopes de neutralisation croisée existent dans ce vaccin et pourraient provoquer des anticorps IgG neutralisants croisés significatifs en présence de réponses préexistantes L’exposition au vaccin H1N1 est susceptible de modifier l’ordre hiérarchique des réponses immunitaires préexistantes à virus de la grippe Ces découvertes donnent un aperçu de l’évolution de l’immunité humaine aux virus de la grippe après avoir été infectés par plusieurs virus grippaux et vaccinés

En 2009, un nouveau virus grippal pandémique H1N1 avec une combinaison de segments de gènes dérivés des lignées porcines nord-américaines et eurasiennes a été identifié [1, 2] Une vaccination de masse mondiale a été mise en place pour prévenir sa propagation et réduire les maladies et les décès. Plusieurs preuves ont été rapportées sur l’innocuité, l’immunogénicité et l’efficacité de la protection de ce vaccin [3-5] Cependant, très peu d’informations sont disponibles sur l’influence du vaccin sur les réponses immunitaires aux virus de l’influenza aviaire saisonnière ou hautement pathogène concomitants. Nous avons donc entrepris des expériences pour étudier les activités de neutralisation des virus de la grippe hétérosubtypique dans des échantillons de sérum prélevés chez les receveurs du vaccin contre la grippe pandémique H1N1 de 2009.

MATÉRIAUX ET MÉTHODES

Participants et échantillons de sérum

Vingt-trois employés du Centre clinique de santé publique de Shanghaï SHAPHC ont reçu une dose de 15 μg / 05 ml de vaccin inactivé sans adjuvant de la souche vaccinale contre la grippe pandémique de 2009 A / California / 07/2009, Inoculation intramusculaire de Shanghai Institute of Biological Products le 15 octobre 2009 Les participants à cette étude ont été confirmés pour l’absence de maladie grippale au cours des 3 mois précédant la vaccination. Les femmes enceintes et allaitantes ont également été exclues. Le tableau 1 montre les profils démographiques des participants, composés de 18 femmes et 5 hommes nés entre 1952 et 1989. Les échantillons de base ont été recueillis le jour et juste avant l’administration du vaccin. Les échantillons de postvaccination ont été recueillis le 21ème jour après l’administration du vaccin. Des consentements éclairés écrits ont été obtenus auprès de tous les participants L’étude globale a été examinée et prouvée par le comité d’éthique du SHAPHC

Tableau 1Informations démographiques sur les participants à l’étude et leurs titres d’hémagglutination et d’inhibition Pré et post-vaccination HI titre Sujet non Année de naissance Sexe Prévaccination Post-vaccination 34 1952 femme 10 20 30 1955 femme 40 80 2 1960 homme 20 640 148 1961 femme 20 80 32 1965 homme 40 160 130 1968 femelle 10 640 36 1969 femelle 10 80 40 1971 femelle 20 640 24 1975 femelle 5 320 28 1976 femelle 5 80 15 1977 femelle 10 1280 51 1977 mâle 20 640 10 1979 femelle 20 320 41 1979 femelle 5 320 29 1981 femelle 5 40 120 1981 femme 80 320 127 1981 homme 5 20 93 1982 femme 40 320 121 1982 femme 5 160 9 1983 homme 40 80 39 1987 femme 10 160 35 1989 femme 10 40 123 1989 homme 5 20 HI titre Sujet non Année de naissance Sexe Prevaccination Post-vaccination 34 1952 femme 10 20 30 1955 femme 40 80 2 1960 homme 20 640 148 1961 femme 20 80 32 1965 mâle 40 160 130 1968 femelle 10 640 36 1969 femelle 10 80 40 1971 femelle 20 640 24 1975 femelle 5 320 28 1976 femelle 5 80 15 1977 femelle 10 1280 51 1977 mâle 20 640 10 1979 femelle 20 320 41 1979 femelle 5 320 29 1981 femme 5 40 120 1981 femme 80 320 127 1981 homme 5 20 93 1982 femme 40 320 121 1982 femme 5 160 9 1983 homme 40 80 39 1987 femme 10 160 35 1989 femme 10 40 123 1989 homme 5 20 Abréviation: HI, hemagglutination-inhibitionVoir Grand

Protocole d’immunisation de la souris

Six souris élevées dans des excisions SPF exemptes de pathogènes spécifiques ont été immunisées avec 100 ug de vaccin ADN exprimant HA de grippe pandémique A / Texas / 05/2009 [H1N1], appelé TE09 H1 par voie intramusculaire à intervalles de 2 semaines pendant 4 fois, 6 échantillons de sérum ont été prélevés 2 semaines après l’immunisation finale et combinés par groupe pour le test de neutralisation, ce qui a assuré un volume suffisant d’échantillons de sérum pour différents pseudovirus et une dilution en série.

Tests d’hémagglutination-inhibition

Des échantillons de sérum ont été traités avec l’enzyme RDE pour détruire les inhibiteurs non spécifiques, puis dilués en série 2 fois dans des plaques de microtitration à 96 puits en U, en commençant par 1:10 et en arrêtant à 1: 1280, dans un volume de 50 μL Le titre HI d’hémagglutination-inhibition a été déterminé par l’inverse de la dernière dilution contenant des globules rouges non agglutinés. Le sérum d’un sujet infecté mais infecté par le virus H1N1 de 2009 a été utilisé comme témoin positif et le sérum d’une souris naïve élevée dans des circonstances exemptes de pathogènes spécifiques a été utilisé comme sérum négatif. Des échantillons avec des titres HI ≥ 1: 40 ont été considérés comme séropositifs. La souche virale utilisée était A / Shanghai / 37T / 2009H1N1 SH37T; Acquisition GenBank: ACS27776 ~ ACS27785, qui partage une homogénéité de 9929% des mutations de la séquence de la protéine HA hémagglutinine sont P100S, S220T, I338V, et V428I à A / California / 07/2009 accession GenBank: ACP41953; Données supplémentaires; En ligne seulement

Génération de l’antigène grippal HA / Neuraminidase Pseudotyped Lentivirus

45 x 106 cellules d’empaquetage 293T ont été cotransfectées avec 5 pg de vecteur lentivirus pNL4-3LucR-E-, 25 pg de pVKD-HA et 25 pg de pVKD-NA en utilisant Lipofectamine 2000 de Invitrogen Frederick, MD Les séquences HA ont été humanisées à partir de la grippe pandémique TE09 de 2009 H1 GenBank accession: ACP41934; virus de la grippe saisonnière, y compris A / Brisbane / 59 / 2007H1N1 désigné BR07 H1, accession GenBank: ACA28844, A / Singapore / 6 / 1986H1N1 HA désigné par SI86 H1, GenBank No ABO38395, A / Japan / 305 / 57H2N2 désigné par JA57 J2 L’accession GenBank: AAT664161, et A / Moscow / 10 / 1999H3N2 désigné par MO99 H3, accession GenBank: AAT08002; et la grippe aviaire hautement pathogène A / Viet Nam / 1203 / 2004H5N1 désignée par VN04 H5, accession GenBank: AAW80717 La séquence de la neuraminidase NA est dérivée de A / Shanghai / 37T / 2009H1N1 désignée par SH37T, accession GenBank: ACS27784 Après incubation pendant la nuit, cellules Les surnageants contenant le pseudotype viral ont été récoltés en 16-20 heures et conservés à -80 ° C en aliquotes jusqu’à utilisation dans un test de neutralisation. L’arbre phylogénétique de l’acide aminé a été lavé une fois avec du PBS et cultivé dans 5 ml. les séquences de HA utilisées dans HI et les tests de virus pseudotypés sont montrés dans la Figure 1 supplémentaire en ligne seulement

Enlèvement de l’immunoglobuline G

Quatre échantillons de sérum présentant les activités de neutralisation croisée les plus élevées contre VN04 H5 ont été sélectionnés pour la déplétion de l’immunoglobuline G IgG IgG a été éliminée en utilisant des billes de protéine S Sepharose. On a lavé 3 fois 200 pi de Protéine G Sepharose Beads avec une solution saline tamponnée au phosphate. PBS Au lavage final, le surnageant a été aspiré après centrifugation et 100 ul de sérum rassemblé ont été ajoutés. Le mélange sérum-billes a été incubé à 4 ° C sous agitation rotative pendant 1 heure, centrifugé et le surnageant a été conservé sous forme de sérum appauvri en IgG. Toutes les étapes ont été répétées 3 fois pour éliminer les IgG abondantes

Test de neutralisation basé sur le pseudotype

Des échantillons de sérum humain ou des échantillons de sérum appauvris en IgG ont été dilués deux à trois fois en série et incubés avec des quantités indiquées de virus pseudotypé au volume final de 150 ul à 37 ° C pendant 1 heure, puis le mélange a été ajouté à des cultures de Madin. Après une nuit d’incubation, les cellules ont ensuite été lavées avec du PBS et cultivées dans du DMEM complet pendant 48 heures. L’activité de luciférase RLA a été mesurée par un dosage BrightGlo Luciferase selon les instructions du fabricant Promega, Madison, WI Dans le test, le neutralisant Le pourcentage d’inhibition a été calculé comme suit: RLA dans le contrôle moyen – RLA dans le sérum à une dilution donnée / RLA dans le contrôle moyen La concentration inhibitrice à 50% IC50 a été rapporté comme les dilutions d’un sérum donné qui ont entraîné une réduction de 50% des RLA. Pour un test basé sur les pseudovirus, une inhibition de 50% a été considérée comme négative. Dans le cas des expériences sur des souris, des échantillons de sérum prélevés deux semaines après l’immunisation finale et combinés par groupe ont été utilisés dans le test d’activité neutralisante.

Analyses statistiques

Les titres moyens géométriques des GMT ont été calculés en attribuant un titre de 5 aux échantillons sans anticorps HI détectables au titre de dilution de départ & lt; 10 Le test de Wilcoxon a été utilisé pour calculer la valeur de P par rapport à GMT entre les données appariées. La corrélation des moments du produit de Pearson a été utilisée pour calculer la corrélation. Les figures ont été tracées à l’aide du logiciel GraphPad Prism

RÉSULTATS

Réponses d’anticorps au virus de la grippe H1N1 pandémique homologue

Nous avons évalué l’immunogénicité du vaccin contre la grippe pandémique H1N1 chez les receveurs Comme prévu, 18 des 23 participants présentaient des anticorps anti-VIH H1N1 homologues avant ou après immunisation, alors que les 5 autres participants présentaient un taux d’IHH avec le titre. supérieur à 40, bien qu’ils n’aient signalé aucune maladie ou symptôme grippal au cours des 3 derniers mois. Tableau 1 Conformément aux autres rapports, le titre IH a significativement augmenté chez tous les participants avec une étendue variable le jour 21 après la GMT 1312 vs 1506, P & lt; 0001, Tableau 1 et 870% 20 des 23 participants avaient un titre supérieur à 40 [3, 5] Nous avons également utilisé un test de neutralisation plus sensible, un test basé sur la luciférase et le pseudovirus, pour mesurer l’activité de neutralisation contre la pandémie H1N1 Figure 1A, barre grise Comme tous les participants n’avaient aucun antécédent d’exposition à la grippe A H1N1 de 2009, il est probable que ces activités de neutralisation résultent d’anticorps croisés développés Cette observation peut expliquer pourquoi la majorité des infections par le virus grippal A H1N1 de 2009 se sont manifestées par une infection subclinique. Fait intéressant, malgré la présence d’importantes activités de neutralisation croisée, une dose du vaccin H1N1 de 2009 a entraîné une augmentation significative des activités de neutralisation chez 21 des 23 bénévoles Figure 1A, barre sombre Le total neutre Les activités IC50 étaient étroitement associées aux titres IH totaux Figure 1B, et l’augmentation de la CI50 par rapport aux valeurs initiales était également corrélée à l’augmentation des titres HI à partir de la Figure 1C, indiquant que ces 2 dosages sont comparables et que le test basé sur les pseudovirus est fiable

Figure 1View largeTélécharger les réponses immunitaires immunologiques dans les échantillons sériques des vaccinataires pandémiques 2009 Vingt-trois volontaires ont reçu 1 dose de vaccin pandémique 2009 Des échantillons sériques ont été prélevés avant et 21 jours après la vaccination A, les titres individuels IC50 ont une concentration inhibitrice 50% avant et après B, Corrélation entre les titres de CI50 et les titres HI d’inhibition de l’hémagglutination dans les échantillons sériques après la vaccination C, Corrélation entre l’augmentation du titre HI de la pré-HI pré-HI et la variation de la valeur IC50 post-IC50 Les échantillons de sérum ont été prélevés avant et 21 jours après la vaccination. A, Les titres individuels de CI50 ont une concentration inhibitrice de 50% réciproque avant et après le vaccin. Vaccination sombre B, Corrélation entre les titres de IC50 et les titres HI d’inhibition de l’hémagglutination dans les échantillons sériques après vaccination C, Corrélation entre l’augmentation du titre HI de la pré-HI pré-HI et la variation de la valeur du IC50 post-IC50 pré-IC50 que le vaccin contre la grippe pandémique H1N1 est immunogène et qu’il est capable d’induire à la fois des anticorps anti-VIH et anti-neutralisants

Le vaccin antigrippal 2009 contre la grippe pandémique stimule les réactions croisées à d’autres sous-types de virus grippaux

Nous avons ensuite évalué si les anticorps de neutralisation provoqués par le vaccin pandémique 2009 avaient un impact sur d’autres virus influenza A en testant les activités de neutralisation croisée contre les hétérosubtypes H1N1, H2N2, H3N2 et H5N1. Nous avons d’abord testé les activités de neutralisation contre les pseudovirus HA. Remarquablement, les échantillons de sérum de base présentaient déjà des titres de neutralisation très élevés pour ces 2 virus de la grippe saisonnière, ce qui indique qu’une infection ou une vaccination antérieure a imprimé le système immunitaire et développé l’immunité préexistante. malgré la présence d’activités de neutralisation élevées contre le MO99 H3, les titres IC50 ont augmenté de façon marquée chez 11 des 21 participants après la vaccination, alors que seuls 2 sujets sur 10 ont augmenté leurs titres à BR07 H1 En outre, les titres IC50 à MO99 H3 dans les échantillons de sérum postvaccination étaient significativement corrélés avec le ti En outre, les augmentations des titres de CI50 à MO99 H3 par rapport aux valeurs initiales étaient également significativement corrélées aux augmentations des titres HI par rapport à TE09 H1 à partir de la ligne de base Figure 2A et 2B Ces données indiquent que le vaccin pandémique de 2009 a amplifié les réponses croisées réactives à la grippe saisonnière MO99 H3 mais pas BR07 H1

Figure 2View largeTélécharger les activités de neutralisation des réactions croisées aux hétérosubtypes des virus grippaux dans les échantillons sériques des bénéficiaires de vaccins pandémiques de 2009 Activités de neutralisation contre A / Moscou / 10 / 1999H3N2 A, A / Brisbane / 59 / 2007H1N1 B, A / Japon / 305 / 57H2N2 C et A / Viet Nam / 1203 / 2004H5N1 D gauche, titres individuels IC50 de concentration inhibitrice 50%; milieu, corrélation entre les titres IH d’hémagglutination-inhibition à la grippe pandémique et les titres de CI50 au virus testé dans les sérums après la vaccination; droite, corrélation entre l’augmentation des titres IH de la grippe pandémique par rapport au départ et le changement de l’ampleur des titres de CI50 à virus testéFigure 2View largeTélécharger les activités de neutralisation croisée aux hétérosubtypes des virus grippaux dans les échantillons sériques des bénéficiaires du vaccin pandémique 2009 Activités de neutralisation contre A / Moscou / 10 / 1999H3N2A, A / Brisbane / 59 / 2007H1N1B, A / Japon / 305 / 57H2N2C et A / VietNam / 1203 / 2004H5N1D gauche, titres individuels de concentration inhibitrice 50% IC50; milieu, corrélation entre les titres IH d’hémagglutination-inhibition à la grippe pandémique et les titres de CI50 au virus testé dans les sérums après la vaccination; à droite, corrélation entre l’augmentation des titres HI de la grippe pandémique par rapport à la valeur initiale et le changement de l’intensité des titres de CI50 au virus testé Nous avons ensuite testé si les anticorps de neutralisation induits par le vaccin étaient capables de réagir croisé avec JA57 H2, un virus qui épidémie de grippe asiatique au Japon qui a commencé en mai 1957 [6] De façon inattendue, les activités de neutralisation contre JA57 H2 ont été élevées chez la moitié des receveurs après la vaccination; Figure 2C, panneau du milieu Ces données peuvent indiquer que les anticorps de neutralisation croisée contre JA57 H2 peuvent entrer en compétition avec les réponses HI à TE09 H1 En outre, nous avons également quantifié les activités de neutralisation croisée à l’influenza aviaire hautement pathogène VN04 H5 L’activité de neutralisation H5 a été facilement présentée dans les échantillons de sérums de prévaccination à des titres relativement plus faibles que pour H3 ou H1. les activités ont été profondément augmentées chez 21 des 23 sujets vaccinés, et des corrélations significatives ont été observées dans les titres totaux et dans l’augmentation de la valeur de la CI50 avec HI à TE09 H1, indiquant que l’élévation de l’activité de neutralisation H5 a été attribuée à l’administration de le vaccin pandémique 2009 Figure 2D Cependant, aucun asso les relations entre les niveaux d’activités de neutralisation hétérotypique améliorées et les âges ont été observées dans ce petit groupe de données non montrées

Diminution profonde des activités neutralisantes à réactivité croisée après l’épuisement des anticorps IgG

Pour comprendre la nature de cette réactivité croisée, nous avons déterminé les activités de neutralisation croisée des échantillons de sérum après la déplétion des IgG. Quatre échantillons de sérum, y compris les sujets 15, 28, 32 et 36, ont été sélectionnés pour la déplétion. Comme prévu, l’épuisement des IgG a entraîné une diminution spectaculaire des activités de neutralisation contre TE09 H1 homologue et VN04 H5 hétérosubtypique à des degrés divers. les activités de neutralisation réactive contre VN04 H5 ont été complètement supprimées après la déplétion des IgG, les activités de neutralisation contre TE09 H1 homologue ont été seulement partiellement éliminées bien qu’une diminution profonde a été observée chez 3 patients sur 4 Tableau 2 Étonnamment, les activités de neutralisation sont restées intactes chez 1 patient sujet 36 après l’élimination des IgG des échantillons de sérum, bien que l’épuisement avait En outre, ces observations ont coïncidé avec l’absence d’amélioration des activités de neutralisation de ce sujet après vaccination avec le vaccin contre la grippe pandémique de 2009. Ces données suggèrent globalement que les activités de neutralisation largement médiée par les anticorps IgG, alors que les activités de neutralisation homologues peuvent être médiées par les anticorps IgG et non IgG

Tableau 2 Diminution fondamentale des activités neutralisantes à réactivité croisée après la déplétion des anticorps anti-immunoglobine G Souche de virus ID du sujet IgGa IgG-b TE09 H1 15 32805 1215 28 32805 405 32 32805 405 36 1215 1215 VN04 H5 15 2430 & 2028 810 & 20 32 540 & lt; 20 36 540 & lt; 20 Souche de virus Objet ID IgGa IgG-b TE09 H1 15 32805 1215 28 32805 405 32 32805 405 36 1215 1215 VN04 H5 15 2430 & lt; 20 28 810 & lt; 20 32 540 & lt; 20 36 540 & lt; 20 Abréviations: IgG, immunoglobine G; TE09 H1, A / Texas / 05 / 2009H1N1; VN04 H5, A / Viet Nam / 1203 / 2004H5N1aIgG indique que les échantillons de sérum contenant des anticorps IgGbIgG- indiquent les échantillons de sérum appauvri en IgGView Large

Vaccination Avec 2009 Immunogène HA dérivé de l’influenza pandémique Essais de neutralisation homologue principalement homologués chez des souris naïves d’influenza

Nous avons proposé que les anticorps de neutralisation croisée observés au départ ont été développés par la pré-exposition à la grippe saisonnière ou la vaccination, et le vaccin antigrippal pandémique H1N1 de 2009 pourrait contenir des épitopes de neutralisation croisée, renforçant ainsi les activités de neutralisation croisée contre H5N1 , H3N2 et H2N2 Nous avons testé cette hypothèse chez la souris Des souris reproductrices SPF naïves à la grippe ont été vaccinées 4 fois avec de l’ADN exprimant HA de la grippe pandémique H1N1 2009, et les activités de neutralisation de différents sous-types de virus grippaux ont été quantifiées par un pseudo-virus identique. De manière inattendue, des activités de neutralisation vigoureuses n’ont été observées que contre le pseudovirus homologue TE09 H1 dans les échantillons de sérum vaccinés contre la grippe pandémique de 2009, alors que seules des activités marginales ont été observées. identifié pour BR07 H1 a JA57 H2, et aucune activité détectable n’a été observée contre SI86 H1, MO99 H3 et VN04 H5 Ces données suggèrent que les épitopes de neutralisation homologues sont hautement immunogènes dans le vaccin pandémique H1N1 de 2009 et sont ainsi capables de produire des anticorps de neutralisation vigoureux, alors que la neutralisation croisée les epitopes sont trop faibles dans leur immunogénicité pour rivaliser avec les épitopes homologues, et ne parviennent pas à déclencher des activités de neutralisation croisées significatives lorsque ce vaccin est administré seul

Figure 3View largeTélécharger la vaccinationVaccination à l’hémagglutinine hémagglutinine 2009 dérivée de la grippe pandémique Principalement des anticorps de neutralisation homologués chez des souris naïves de grippe Six souris par groupe élevé dans un environnement exempt d’agents pathogènes ont reçu 4 × ADN d’un vaccin pandémique exprimant Deux semaines après l’inoculation finale, des échantillons de sérum ont été collectés et combinés par groupe. Les activités de neutralisation contre les virus grippaux aviaires homologues, saisonniers et hautement pathogènes chez les souris vaccinées ▴ et simulées Δ ont été montrées dans des dilutions en série , des triplicats ont été fixés pour chaque dilution, et la barre d’erreur moyenne / moyenne a été utilisée dans le graphique Moins de 50% d’inhibition a été considérée comme négative, la dilution finale d’échantillons sériques pouvant atteindre ≥50% d’inhibition a été considérée comme titre d’échantillon sérique Puisque les échantillons de sérum provenant de 6 souris ont été combinés pour ce test, la valeur pour chaque dilution de l’échantillon de sérum représente t Vaccination avec l’hémagglutinine de 2009, hémagglutinine dérivée de la grippe pandémique Principalement des anticorps de neutralisation homologue chez des souris naïves de la grippe Six souris par groupe élevé dans un environnement exempt de pathogènes spécifiques ont reçu 4 × de l’ADN exprimant le vaccin pandémique Deux semaines après l’inoculation finale, des échantillons de sérum ont été recueillis et combinés par groupe. Les activités de neutralisation contre les virus de l’influenza aviaire homologues, saisonniers et hautement pathogènes chez les souris vaccinées ▴ et chez les souris témoins Δ ont été montrées. Des dilutions en série de 2 fois, des triplicats ont été fixés pour chaque dilution, et la barre d’erreur standard a été utilisée dans la parcelle. Moins de 50% d’inhibition a été considérée comme négative, la dilution finale des échantillons sériques pouvant atteindre comme titre d’échantillon de sérum Etant donné que des échantillons de sérum provenant de 6 souris ont été combinés pour ce test, la valeur de chaque échantillon de la dilution totale représente la valeur moyenne de 6 souris

DISCUSSION

Il est important de s’interroger sur l’influence du vaccin pandémique sur l’immunité contre les virus grippaux aviaires ou hautement pathogènes. Nous signalons les effets d’un vaccin pandémique sur les réponses immunitaires humorales à d’autres sous-types de virus grippaux chez les sujets vaccinés. Le résultat est cohérent avec l’observation chez les patients infectés par le virus pandémique [8] Nous avons proposé à partir de ces données que les réactions croisées pourraient affecter les recommandations concernant la composition des immunogènes vaccinaux antigrippaux. Des épitopes réactifs de neutralisation peuvent exister dans ce vaccin et ont ainsi la capacité de produire de larges anticorps de neutralisation croisée contre différents sous-types de virus grippaux. De façon inattendue, lorsque nous avons testé cette idée chez des souris, nous avons observé que l’inoculation seulement capable t o susciter des activités de neutralisation élevées du virus apparenté H1N1, mais seules des activités de neutralisation marginales ont été observées sur BR07 H1 et JA57 H2, et aucune n’a été observée sur SI86 H1, MO99 H3 et VN04 H5. L’écart d’observation entre humains et souris peut s’expliquer par le différentes activités de neutralisation au départ, de vigoureuses activités de neutralisation croisée ont été identifiées dans des échantillons humains au départ, alors qu’aucune activité n’a été détectée dans des échantillons de souris en l’absence de vaccination, comme le montrent les souris immunisées témoins. Ces données démontrent que l’immunité préexistante , comme observé dans notre étude, joue un rôle important dans la finalisation de la composition de l’immunité, et que l’inoculation du vaccin pandémique de 2009 a stimulé et renforcé les activités de neutralisation croisée préexistantes, mais pas de novo cross-reactive activités de neutralisation réactives En d’autres termes, les épitopes de neutralisation à réactivité croisée existent en 2009 vaccin contre la grippe pandémique; leur immunogénicité ne s’est manifestée qu’en présence de leurs activités neutralisantes à réaction croisée préexistantes L’existence d’une immunité croisée entre les infections grippales antérieures et la grippe pandémique de 2009 a été observée dans plusieurs rapports et a démontré que la pré-exposition à la grippe pandémique H1N1 ou à 2007 La grippe saisonnière H1N1 pourrait avoir renforcé les anticorps neutralisants croisés contre la grippe pandémique de 2009 [9, 10] De même, une infection répétée par des virus grippaux saisonniers améliore la protection et la clairance de la grippe pandémique de 2009 chez les furets [11] En outre, l’immunisation par des vaccins antigrippaux trivalents inactivés a induit des anticorps neutralisants à réaction croisée contre la grippe pandémique de 2009 chez les humains [13] et contre la grippe hautement pathogène H5N1. virus chez la souris m odels [14] Les épitopes réagissant de façon croisée peuvent être moins immunogènes, un puissant adjuvant étant nécessaire pour manifester l’effet protecteur croisé d’un vaccin antigrippal H1N1 inactivé contre un virus H3N2. [15] Un rapport récent montre qu’il est largement répandu l’existence d’anticorps anti-influenza humains hétérosubtypiques largement neutralisants [16] Toutes ces observations ainsi que nos données confortent largement la véracité de l’hypothèse du péché antigénique original proposée par Thomas Francis en 1960 [17], et l’exposition à une souche grippale distincte de la précédente a non seulement entraîné le développement de l’immunité à la souche actuelle, mais a également stimulé la réponse immunitaire à la souche virale précédente; par conséquent, l’histoire d’exposition à différents virus grippaux dicte la hiérarchie de l’immunité croisée, ce qui souligne l’importance d’utiliser des immunogènes anti-HA conjugués pour amorcer et amplifier afin de susciter de larges anticorps de neutralisation croisée dans le contexte d’un développement de vaccins Cependant, le phénomène du péché antigénique originel entraîne la compétition entre l’immunité préexistante et l’immunité nouvellement développée et atténue ainsi les réponses immunitaires à l’infection virale courante, et par conséquent peut émousser la protection contre l’infection grippale actuelle. Les anticorps pré-existants de neutralisation croisée Les virus de la grippe saisonnière peuvent expliquer pourquoi la majorité des infections de 2009 contre la grippe A H1N1 étaient des infections subcliniques dans les populations adultes. Nos données nous informent que la pandémie de grippe influera non seulement sur la propagation de son virus apparenté, mais aussi sur le virus hétérosubtypique. La compréhension des influences réactives croisées entre les virus de la grippe nous aidera à mieux connaître l’immunité existante dans les populations, à prédire la prochaine vague possible de grippe pandémique et à mieux comprendre l’immunité à la neutralisation croisée établie.

Remarques

Remerciements

Les auteurs remercient tous les participants à l’étude pour leur don d’échantillons de sang, et Yassir F Abubakar pour son aide éditoriale

Aide financière

Ce travail a été soutenu par les subventions 2012ZX10001-006 et 2009ZX10602-11, le ministère chinois de la Santé, et le programme de recherche fondamentale 10JC1413600 et le programme conjoint Shanghai-Canada 09540701100, Commission des sciences et de la technologie de Shanghai Municipalité, Shanghai

Conflits d’intérêts potentiels

Tous les auteurs: Aucun conflit rapporté Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits d’intérêts potentiels Conflits que les éditeurs considèrent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués